· полиакриламидГел мора акриламид мономер, полазнички материјал полимеризације, катализатости и десно од смеше соли и пуфера заједно.
· акриламиди бис (н, н '- метилен двоструки акриламид) је мономер формат гел матрица.
· Амонијум перфелурфат Покретање поступка лепљивог полимеризације. Формулација лепила захтева 10% раствора амонијум-асортимана припремљена у води. Већина информација је показала потребу за активном употребом. Међутим, 10% раствор се може поставити на 4 ℃ неколико недеља без значајног губитка активности. Направите до 10 мл и одбаците када лепак не успе да се агрегира.
Савет: ПроценатакриламидУ секвенцирању лепку и лепку протеина није исти. Ако користите Премаде Акриламиде: БИС раствор, обавезно набавите праву боцу.
· Темед (Н, Н, Н ', Н' - тетраметил етилендиамин) је катализатор, у смеђој боци, смештен у фрижидер. Додајте непосредно пре сипања лепила.
· Полиакриламидна електрофореза половних стакла у електрофорези треба да се испере пре и после сваког времена. Након електрофорезе, опрати меком четком и крпом у врућој сапуници, исперите дестилованом водом и станите да се осуши.
· Влажност и прашина могу изазвати шупље полимере. Пре електрофорезе очистите стаклену плочу чистачем стакла и обришите га меком четком. Оперите се са дестилованом водом и темељно се осушите папиром. Испирање са 70% етанолом пре брисања папира помаже да се очистите и убрзате сушење. Додајте узорке акриламида узастопно: БИС, вода, пуфер раствор, амонијум персолубит, избачен. Добро се протрести и сипајте одмах.
Пре него што полимеризација није неопходно да се дегас полиакриламид дегас. (Акриламид се некада постављао у вакуум за уклањање мехурића јер кисеоник инхибира полимеризацију.)
Хоризонтални савети за узорке лепка за лепљење.
· Ставите комад црног папира у доњу кутију, црну позадину да направите мало рупе узорака да јасније види.
· Лепак пуњени пуфер са пуњеним, баш преко колоида.
· Ако ивица има светло, упалите светла, нека светлост светли колоид. Нацртајте узорак у пипету.
· Помоћу аутоматског уређаја за пипетирање.
· У 10-200 МУ 1 Покретна тачка течности може се користити у већини бодова на узорку. За врло мале рупе за узорке (мање од 10 μ1), дугачка глава пипета која се користи за секвенцирање лепка је прикладније.
· Пипетирање је само уроњен у узорак, удисање полако покретне течности. Узорак се може појавити лепљиви глицерин, а брзо пумпање може увући мехуриће ваздуха у главу пипета.
· Узорци Након удисања главе пипетирања, нежно ће померити главу течности на ивици цеви или брисача сиса течне главе за усисавање изван капљица. Пазите да не сисате узорак.
Узорак ставите у рупу у узорку
· Лимит за пипетирање да задржите мали притисак, натерајте да узорци благо померају преливу течни главу.
· Глава пипетирања убачена у међуспремник, незнатно виша од тачке рупа, одржавајте позитиван притисак. Врх пипете може се уметнути у малу рупу.
· Полако и упорно узорци. Врх пипете постављен је изнад рупе за узорак тачке, а узорак ће потонути у рупу. Пустите да узорка умире рупу у узорку уместо да се гурне.
· Једном када ће се последња кап узорка са течношћу поћи у другу ногу, полако подигните потез течности, померите се из пуфера
Како радити вертикално узорака лепка?
· Вертикална рупа за узорак лепила формирана између два комада стакла. У врло танком лепилу, глава пипета се не може убацити ни између две стаклене плоче. Гледајте глицерин! Ставите главу пипете преко узорка и узорак ће потонути у рупу.
· Поинтни узорак пре, обавезно ставите вертикалну тачку полипропилен ацил гелског узорка је испран чисто. Оперите неполимеризовано акриламид и воду која се може појавити на дну рупе узорка. Вода може учинити рупу у узорку знатно мањи. Користите 25мл или 50мл шприц и иглу од 18 мерача. Сипајте у пуфер електрофорезе и пажљиво испрати рупу узорка.
· Може бити тешко видети рупу узорка, али истовремено, остало је лако. Ако постоје вишак рупа, узорак се може тестирати бромофенолом плавим.
Вријеме поште: Мар-31-2023